Polar MC-IMAC 填料是一種金屬親和填料,適用于純化帶有組氨酸 ( His ) 標(biāo)簽的重組蛋白,這類重組蛋白廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域。該填料以親水性聚甲基丙烯酸酯微球為基質(zhì),粒徑為 30 μm 或 60 μm,孔徑為 800 Å,具有較高的物理和化學(xué)穩(wěn)定性。填料表面具有高度的親水性,最大程度地避免了與生物類樣品的非特異性吸附。在親水性表面,以專有連接物鏈接了能螯合多價金屬離子的羧酸基團。
Polar MC-IMAC 填料有兩種類型:游離酸型(Polar MC30-CA Excel 或 Polar MC60-CA Excel,羧酸 ) 和螯合鎳離子型 ( Polar MC30-Ni Excel 或Polar MC60-NiExcel)。游離酸型可用于金屬離子去除,也可根據(jù)客戶要求定制他金屬離子型填料。這兩種類型的 IMAC 填料結(jié)構(gòu)如圖 1 所示。
圖1a. Polar MC30/60-CA Excel的化學(xué)結(jié)構(gòu)
圖1b. Polar MC30/60-Ni Excel的化學(xué)結(jié)構(gòu)
該填料高度穩(wěn)定,可耐受 0.5 M NaOH 接近100次清洗循環(huán)。螯合金屬離子的填料能在 0.1 M 乙二胺四乙酸 (EDTA) 的清洗條件下不損失金屬離子,因此每次使用后無需再補充金屬離子。這兩種填料都可以散裝、 FPLC 柱或常規(guī) HPLC 柱的形式提供。
填料類型 | Polar MC30-CA Excel, Polar MC30-Ni Excel Polar MC60-CA Excel, Polar MC60-Ni Excel |
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包裝條件 | 50%(v/v)懸浮液,在20%乙醇中保存 | |
基體 | 親水性聚甲基丙烯酸酯 | |
粒徑 | 20 ~ 45 μm (平均30 μm) 45 ~ 90 μm (平均60 μm) |
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孔徑 | 800 Å | |
pH穩(wěn)定范圍 | 基礎(chǔ)填料Polar MC-CA Excel:1-13 | |
金屬離子螯合填料 Polar MC-Ni Excel:1-13 | ||
載量 | Polar MC30-CA Excel | >120 μeq. carboxylic group /mL |
Polar MC30-Ni Excel | 40-60 μeq.Ni++ /mL | |
Polar MC60-CA Excel | >100 μeq. carboxylic group /mL | |
Polar MC60-Ni Excel | 40-60 μeq.Ni++ /mL | |
組氨酸標(biāo)記蛋白(His-protein)載量 | Polar MC30-Ni Excel, ~20 mg/mL Polar MC60-Ni Excel, ~15 mg/mL |
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操作溫度 | ≤40 °C | |
操作壓力 | ≤30 MPa (30 bar) | |
流動相兼容性 | 水溶液,或水和乙腈、丙酮或甲醇的混合物。 常用緩沖液:磷酸鹽、三羥甲基氨基甲烷(Tris)和醋酸鹽,也與6M鹽酸胍、8M尿素、0.1 M EDTA、10 mM DTT相容 |
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線性流速 | ≤1800 cm/h |
填料種類 | 粒徑 | 貨號 |
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Polar MC30-CA Excel | 30 μm | 270530800 |
Polar MC30-Ni Excel | 30 μm | 270630800 |
Polar MC60-CA Excel | 60 μm | 270560800 |
Polar MC60-Ni Excel | 60 μm | 270660800 |
預(yù)裝柱規(guī)格為1、4.2、5 mL,包裝規(guī)格為5 L以下及5 L、10 L、50 L